WWW.METODICHKA.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Методические указания, пособия
 


Pages:     | 1 |   ...   | 11 | 12 || 14 | 15 |   ...   | 25 |

«Биология внутренних вод Материалы XV Школы-конференции молодых учёных (Борок, 19–24 октября 2013 г.) УДК 57 ББК 28 Б 63 Биология внутренних вод: Материалы XV Школы-конференции молодых ...»

-- [ Страница 13 ] --

– 40 экз. Для изучения брались одноразмерные особи с наибольшей частотой встречаемости в данной выборке. Методом для исследований был выбран диск-электрофорез полипептидов в полиакриламидном геле (Глазко, 1988). В качестве экстрагирующего раствора, после ряда экспериментов, использовался 20% раствор сахарозы на 0,05М Трис-HCl буфере pH 7,5 с добавлением 0,001М раствора EDTA·Na2. В данном растворе, благодаря использованию буфера, по значению pH близкого к физиологическому, белки способны сохранять свои нативные свойства продолжительное время, а за счет добавления EDTA·Na2 не только устраняются ионы тяжёлых металлов, но и повышается устойчивость белковых молекул в растворе. Пропорция ткань:раствор составляла 1:2. Далее пробы подвергались стандартной процедуре криогенного лизиса (Остерман, 1981) с последующим центрифугированием при 26000 об. в минуту на центрифуге СК-4 с угловым ротором РУ-8 в течение 20 минут.

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

В работе представлен материал по наиболее показательным локусам: мышечная лактатдегидрогеназа-А (LDH-A*, E.C. 1.1.1.27), малатдегидрогеназа NADP-зависимая (ME-1*, E.C. 1.1.1.40), аспартатаминотрансфераза (AAT*, E.C. 2.6.1.1), 2-нафтилацетат-зависимая эстераза (bEST-2*, E.C. 3.1.1.x).

Для выявления ферментов в сложной смеси белков после электрофореза использованы реакции, специфичные для конкретной ферментной системы. При гистохимическом выявлении изоферментов пользовались общепринятыми методиками, основанными на базовых руководствах по выявлению ферментативной активности (Manchenko, 2003). В изучение популяционной структуры входят следующие задачи: оценка частот аллелей и генотипов, определение равновесных частот аллелей, доли полиморфных локусов, гетерозиготности, приспособленности и вычисление теоретической интенсивности давления отбора. Расчёт этих параметров детально рассмотрен в ряде фундаментальных руководств (Ли, 1978; Хедрик, 2003) и здесь не представлен. Популяционно-генетический анализ проводился с использованием программы Biosys r.2 (University of Illinois, USA). Достоверность изменения аллельных частот оценивалась по критерию 2 в программе Statistica v.6.1 (StatSoft, Inc.).

Результаты и обсуждение Данные по сезонному изменению аллельных частот четырёх изученных локусов приведены в табл. 1. Изменение интенсивности отбора, вычисленная через разницу ожидаемых и наблюдаемых частот аллелей графически представлена на рис. 1. Представленные данные позволяют установить несколько возможных вариантов динамики аллельных частот.

Для локуса аспартатаминотрансферазы характерна значительная константность частот аллелей.

Достоверных изменений этого параметра между сезонами не наблюдается (p0,05). Вероятно, значимого влияния на зимовку и размножение данный локус не оказывает, хотя частоты аллелей несколько изменяются в осенне-зимний период.

Иная картина наблюдается для аллелей локуса лактатдегидрогеназы-A. В зимний период частота аллеля LDH-A*100 невелика, а к началу весеннего сезона ещё более снижается (2=11,19; p0,05).

В весенне-летний период частота аллеля *100 возрастает (2=10,13; p0,05) и к концу лета достигает своего годового максимума. К началу осени частота аллеля *100 вновь начинает достоверно снижаться (2=4,81; p0,05).

Дифференциальное выживание особей, различных по генотипам LDH* описано для многих видов рыб (Кирпичников, 1987). Вероятно, для тюльки сезонные колебания частоты аллеля LDH-A*100 в предзимний период связаны с элиминацией мальков первой и второй порций нереста. Наибольшее давление отбора по локусу LDH-А* наблюдается при смене летнего сезона на осенний, когда происходит наибольшая смертность Таблица 1. Сезонные изменения частот медленномигрирующих сеголетков тюльки перед зипо отношению к аноду) аллельных вариантов некоторых гене- мовкой.

тических локусов тюльки. Для локуса 2Сезон нафтилацетат-зависимой эстеЗима» «Весна» «Лето» «Осень»

Аллель разы также характерно летнее LDH-A*100 0.22 0.20 0.28 0.19 увеличение частоты аллеля bEST-2*41 0.12 0.10 0.23 0.20 bEST-2*41. К осени его доля AAT*100 0.48 0.45 0.46 0.44 незначительно снижается, а суME-1*100 0.30 0.16 0.20 0.24 щественное достоверное уменьшение наступает лишь в зимний период ( =13,47; p0,05). Вероятно, наибольшее влияние отбора на локус bEST-2* сказывается поздней осенью, когда происходит похолодание и смена кормовой базы.

Для локуса ME-1* начиная с летнего периода характерно постепенное увеличение аллеля MEдостоверное уменьшение которого происходит лишь поздней зимой и в начале весны (2=17,07; p0,05). Для этого генетического локуса характерны два всплеска давления отбора – весной и осенью (рис. 1), что может быть связано со сменой приоритета от выживания к размножению, как это происходит у многих животных (Айала, 1981).

При сравнении типа и интенсивности отбора в течение года для разных генетических локусов тюльки наблюдается различная динамика относительных приспособленностей генотипов (рис. 2).

генетических показателей свидетельствую о сложных сезонных перестройках в генетической структуре популяции, связанными с изменениями возрастного состава и условиями зимовки основной части популяции – сеголетков и особей возраста 1+, что происходит как непосредственно под влиянием сезонных меняющихся абиотических факторов, так и, вероятно, со сменой качественного и количественного состава пищевых организмов.

Благодарности. Автор выражает глубокую благодарность к.б.н. Ю.В. Слынько (ИБВВ РАН) и к.б.н. А.А. Махрову (ИПЭЭ РАН) за консультации на всех этапах работы. Работа выполнена в рамках проекта МК-2049.2013.4 Совета по грантам Президента РФ для государственной поддержки молодых российских учёных.

Список литературы Айала Ф. Механизмы эволюции / Эволюция. М.: Мир, 1981. С. 33–65.

Алтухов Ю.П. Генетические процессы в популяциях. М.: Академкнига, 2003. – 431 с.

Глазко В.И. Генетика изоферментов сельскохозяйственных животных. Итоги науки и техн. ВИНИТИ, 1988.

Сер. Общ. генетика. – 212 с.

Голубцов А.С. Внутрипопуляционная изменчивость животных и белковый полиморфизм. М.: Наука, 1988. – 168 с.

Динамика популяционных генофондов при антропогенных воздействиях. Ред. Алтухов Ю.П. М.: Наука, 2004. – 619 с.

Кирпичников В.С. Генетика и селекция рыб. Л.: Наука, 1987. – 520 с.

Кияшко В.И., Осипов В.В., Слынько Ю.В. Размерно-возрастные характеристики и структура популяции тюльки Clupeonella cultriventris при ее натурализации в Рыбинское водохранилище // Вопр. ихтиол. 2006. Т.46. №1.

С. 68–76.

Ли Ч. Введение в популяционную генетику. М.: Мир, 1978. – 555 с.

Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1981. – 286 с.

Хедрик Ф. Генетика популяций. М.: Техносфера, 2003. – 592 с.

Manchenko G.P. Handbook of detection of enzymes on electrophoretic gels. CRC Press, 2003. P. 1–553.

Seasonal dynamics of genetic indicators kilka’s Clupeonella cultriventris (Normann, 1840) in the Volga reach of Rybinsk Reservoir.

D.P. Karabanov We studied the seasonal dynamics of the allele frequencies of genetic loci AAT *, LDH-A *, ME-1 *, bESTin the kilka’s population of the Volga reach, Rybinsk Reservoir. Allozyme analysis showed that different loci have different effects for the course of the year. A critical stage in the life of kilka is the autumn and winter period (preparation and actual wintering fish) and winter, when there is a change of abiotic factors and the change of the qualitative and quantitative composition of food organisms.

–  –  –

С помощью метода дискриминантного анализа проведена идентификация искусственных и природных гибридов леща и плотвы по комплексу разнородных морфологических признаков.

Введение Сведения о гибридизации между лещом и плотвой в естественных условиях неоднократно встречаются в научной литературе (Первозванский, Зелинский, 1981; Fahy et al., 1988;). В Рыбинском водохранилище естественные гибриды леща и плотвы регистрируются регулярно, однако частота их встречаемости невысока (Слынько, 1997; Столбунов, 2003). Надежность морфологических критериев идентификации гибридов первого поколения в случае четкой дифференцировки родительских видов

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

неоднократно проверена и не вызывает сомнения. В научной литературе имеются работы, посвящённые гибридам плотвы и леща как нативного, так и экспериментального происхождения (Николюкин, 1952; Wood, Jordan,1987). Однако, единая система диагностики гибридов в настоящий момент отсутствует.

Целью данной работы было выявление надежных критериев идентификации гибридных особей (на примере леща, плотвы и их гибридов).

Материалы и методы исследования Морфологический анализ проводили на выборках (каждая объемом 50 экз.) сеголетков (возраст 5 мес.) леща, плотвы, гибридов плотва х лещ и лещ х плотва из генераций 2001, 2002, 2003 и 2004 гг., полученных в результате индивидуальных скрещиваний. Всего изучено потомство от 16 прямых и реципрокных скрещиваний. Анализировался природный материал, собранный на протяжении 1994– 2008 гг. в Рыбинском водохранилище, включающий группы гибридов (108 экз.), леща и плотвы (по 100 экз.) в возрасте от 3+.

Анализировали количественные (пластические и меристические) признаки, надежно различающиеся у родительских видов и используемые в определительных ключах:

I. Меристические признаки: разветвленные лучи в спинном (Db) и анальном (Ab) плавниках, число жаберных тычинок на 1-й жаберной дуге (sp.br.), число глоточных зубов (d.ph.), признаки осевого скелета – число позвонков в грудном (Vа), переходном (Vi), туловищном (Va+Vi) и хвостовом (Vc) отделах, общее число позвонков (Vert); число отверстий в каналах сейсмосенсорной системы в краниальных костях – frontale (CSOfr+par), parietale (CSTpar), praeoperculum (CPMpop), dentale (CPMdn);

число чешуй в боковой линии (l.l.), число рядов чешуй над (SD) и под (SA) боковой линией (Дислер, 1960; Pitts et al., 1997).

II. Пластические признаки, выраженные в процентах длины тела (l) – длина головы (с), длина основания анального плавника (lA), длина основания спинного плавника (lD), антеанальное расстояние (aA), постанальное расстояние (pA), антедорсальное расстояние (aD), постдорсальное расстояние (pD), наибольшая высота тела (H), наименьшая высота тела (h); в процентах длины головы (с) – диаметр глаза (lo) (Правдин, 1966).

При описании признаков определяли средние значения (M), пределы вариации (lim) и ошибку средней (m). Статистический анализ осуществлялся в соответствии с основными методическими требованиями при изучении, как отдельных признаков, так и их комплексов для решения идентификационных задач с применением методов дискриминантного анализа (Ивантер, Коросов, 2003). Стандартизация признаков и статистическая обработка материала проводилась с использованием программного пакета STATISTICA 6.0 (StatSoft Inc, USA).

Результаты и обсуждение Пластические и меристические признаки. Внешне по общим пропорциям тела гибриды занимают промежуточное положение по отношению к родительским видам. Окраска тела серебристосерая или серо-коричневая, иногда с золотистым отливом (в основном у особей старше пяти лет).

Анальный плавник у взрослых гибридов имеет несколько вариантов окраски: а. плавник от светлого до темного серого цвета, иногда с небольшим красноватым пятном в передней его части; б. у некоторых особей наблюдается черная окантовка наружного края по всей длине бледно-оранжевого плавника. При этом не зависимо от окраски анального плавника, в окраске хвостового, спинного, брюшных и грудных плавников постоянно присутствует красный пигмент различной степени насыщенности.

Радужная оболочка глаз у гибридов в верхней части с оранжевым пигментом различной степени насыщенности, нижняя половина радужины беловатая (у плотвы радужная оболочка глаз, в основном, красная, у леща – полностью беловатая с небольшим скоплением серебристо-серого пигмента в верхней части). По пропорциям тела (соотношение высоты и длины тела, размер плавников относительно тела и др.) гибриды занимают промежуточное положение между родительскими видами. При достоверном различии значений признаков у родительских видов для их естественных гибридов отмечаются промежуточные или приближенные к одному из родительских видов значения большинства исследованных признаков.

Оценка идентификационной значимости морфологических признаков. Оценка идентификационной значимости разных морфологических признаков проводилась на искусственно получен

<

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

ных гибридах леща и плотвы, так как в данном случае достоверно известно происхождение каждой особи. Применение дискриминантного анализа (рис.1) исследованных признаков для диагностики гибридов позволяет с большой точностью отделить их от родительских видов. Выделение трех областей с различной степенью перекрывания, позволяет предположить правильный выбор набора признаков для идентификации гибридных особей. Наиболее четкое разделение гибридов и родительских видов дают меристические признаки (рис.1а). Частичная статистика Уилкса показывает, что в общую дискриминацию наибольший вклад привносят признаки Ab, Va+Vi, SD, SA, CSOfr+par, Vc, Db, Vi; на первую дискриминантную функцию (Д.Ф.1) наибольшее влияние оказывают признаки Va+Vi, CPMpop, Db, тогда как вторая дискриминантная функция (Д.Ф.2) определяется в основном признаками SD, SA, CPMdn (табл.1).

Рис.1. Диаграмма рассеяния двух дискриминантных функций для ненормированных значений исследованных меристических (слева) и пластических (справа) признаков леща, плотвы, гибридов плотва х лещ и лещ х плотва (экспериментальный материал).

При анализе комплекса пластических признаков картина разделения выборок методом дискриминантного анализа менее четкая, чем при анализе меристических признаков (рис.1б). Частичная статистика Уилкса показывает, что в общую дискриминацию наибольший вклад привносят признаки lA, lo, lD, pA, aA, c, io, H; на Д.Ф.1 наибольшее влияние оказывают признаки lA, lo, тогда как Д.Ф.2 определяется в основном признаками lD, pA, H (табл.1). Вклад H и h приблизительно одинаковый по обеим компонентам. Данные признаки характеризуются промежуточными абсолютными значениями и значительно влияют на пропорции тела рыбы, привлекающие свое внимание при первичном определении. Поэтому их включение также необходимо при идентификации гибридных особей (Кодухова, Слынько, 2007).

Таким образом, идентификация гибридных особей должна проводиться по комплексу пластических и меристических признаков.

Идентификация гибридных особей из Рыбинского водохранилища. Опираясь на данные, полученные при изучении искусственных гибридов была проведено определение гибридов из естественных условий. Для начала было проведено сопоставление экспериментальных и предполагаемых природных гибридов методом дискриминантного анализа (рис.2а). Для анализа использовались только меристические признаки. Такой выбор обусловлен тем, что значения пластических признаков очень сильно зависят от возраста и условий обитания особей, поэтому сравнение сеголетков и взрослых особей по ним некорректно. Полученная картина распределения подтверждает правильность предварительного определения природных особей как гибридов леща и плотвы по выбранному комплексу признаков, имеющих большой вклад в общую дискриминацию (табл.2). При этом можно предположить, что большинство природных гибридов являются потомками от скрещивания самок леща с самцами плотвы, так как облака значений природных гибридов и экспериментальных гибридов лещ х плотва почти полностью перекрываются.

–  –  –

Рис. 2. Диаграмма рассеяния двух дискриминантных функций: слева – по совокупности меристических признаков сеголетков леща, плотвы, гибридов плотва х лещ и лещ х плотва (экспериментальный материал) и гибридных особей из Рыбинского водохранилища; справа – по совокупности пластических и меристических признаков леща, плотвы и их гибридов (природный материал из Рыбинского водохранилища).

Для определения корректности разделения изучаемых рыб (леща, плотвы и гибридов из Рыбинского водохранилища) набором пластических и меристических признаков произведено вычисление действительных дискриминантных функций.

У включенных в дискриминантный анализ данных внутри групп наблюдений существует многомерное нормальное распределение, отсутствуют корреляции средних значений и дисперсий в группах, также не было сильно коррелирующих (0.6) друг с другом переменных. Независимые вклады каждой значимой переменной в общую дискриминацию между лещом, плотвой и гибридами представлены в таблице 2. Частичная статистика Уилкса показывает, что в общую дискриминацию наибольший вклад привносят признаки Ab, Va, SD, SA, sp.br., l.l., Db, Vert, значительно меньший – пластические признаки.

–  –  –

Канонический анализ показывает, что обе дискриминантные функции являются статистически значимыми (p0.01). На Д.Ф.1 наибольшее влияние оказывают признаки: Ab, SD, SA, l.l., Db, Vert, sp.br., тогда Д.Ф.2 определяется в основном признаком sp.br. (табл.2). Исходя из знания систематических признаков изучаемых видов, можно предположить, что признаки, определяющие Д.Ф.1, в первую очередь служат для разделения родительских видов между собой, тогда как признаки, наиболее тяжело взвешиваемые в Д.Ф.2, служат для выявления вероятных гибридных особей. Это подтверждается и изучением средних канонических переменных: для гибридов средние по первой Д.Ф.1 равны – 0.644, по Д.Ф.2 1.344, для плотвы эти же значения соответственно –11.642 и –1.007, а для леща 14.114 и –0.849. Диаграмма рассеяния двух дискриминантных функций подтверждает такую интерпретацию (рис.2б). Таким образом, исследуя предложенный комплекс морфологических признаков можно достоверно произвести отделение гибридов леща и плотвы от родительских видов. Высокая степень достоверности полученного определения подтверждается расчётом квадратов дистанций Махаланобиса:

точность идентификации достигает 97%.

Заключение С высокой вероятностью гибридных особей и особей родительских видов можно определить по комплексу пластических и меристических признаков (Db, Ab, sp.br., d.ph., Vc, Vert, CSTpar, l.l., SD, SA, с, lA, lD, aA, pA, aD, H, h) с использованием метода дискриминантного анализа. Применение данного метода при идентификации природных гибридов позволяет предположить преобладание в Рыбинском водохранилище гибридных потомков от скрещивания самок леща с самцами плотвы.

Благодарности. Работа выполнена при поддержке Совета по грантам Президента РФ, проект МК - 2049.2013.4.

Список литературы Дислер Н.Н. Органы чувств системы боковой линии и их значение в поведении рыб. М.: Изд-во АН СССР. 1960.

560 с.

Ивантер Э.В., Коросов А.В. Введение в количественную биологию. Петрозаводск: ПетрГУ. 2003. 304 с.

Кодухова Ю.В., Слынько Ю.В. Закономерности наследования морфологических признаков у гибридов первого поколения леща Abramis brama L. и плотвы Rutilus rutilus L. (Cyprinidae) // Биология внутр. вод. 2007. № 4.

С. 70–75.

Николюкин Н.И. Межвидовая гибридизация рыб. Саратов: Саратовское областное государственное издательство. 1952. 312 с.

Первозванский В.Я., Зелинский Ю.П. Морфологические и кариологические особенности гибридов плотвы Rutilus rutilus (L.) и леща Abramis brama (L.) оз. Лососиного (бассейн Онежского озера) // Зоол. журн. 1981.

Т. LX. Вып. 3. С. 388 – 397.

Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб (преимущественно пресноводных). М.: Пищевая промышленность. 1966. 376 с.

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

Слынько Ю.В. Генетическая структура и состояние рыб Рыбинского водохранилища / Современное состояние рыбных запасов Рыбинского водохранилища. Ярославль: Изд-во ЯГТУ, 1997. С. 153-177.

Столбунов И.А. Распределение молоди раб в разнообразных биотопах р. Сутка / Экологическое состояние малых рек Верхнего Поволжья. М.: Наука. 2003. С. 175 – 179.

Fahy E., Martin S., Mulrooney M. Interaction of roach and bream in an Irish reservoir // Archives of Hydrobiology.

1988. V.144. P. 291–309.

Pitts C.S. at al. Controlled breeding studies to verify the identity of roach and common bream hybrids from a natural population // J. Fish Biol. 1997. Vol. 51. P. 686–696.

Wood A.B., Jordan D.R. Fertility of roach x bream hybrids. Rutilus rutilus (L.) x Abramis brama (L.). and their identification // J. Fish Biol. 1987. Vol. 30. P. 249–261.

Determination of the importance of morphological characteristics for the identification of natural hybrids bream Abramis brama and roach Rutilus rutilus in the Rybinskoe reservoir by the method of discriminant analysis Y.V.Kodukhova Using the method of discriminant analysis carried out identification of the artificial and natural hybrids bream and roach on a set of heterogeneous morphological characteristics.

–  –  –

C применением денатурирующего градиентного гель-электрофореза изучена динамика бактериопланктонного сообщества эвтрофного водохранилища в лабораторных микроэкосистемах с добавлением различных аминокислот в разные периоды вегетационного сезона. Также было исследовано влияние добавок аминокислоты лизин в различных концентрациях на бактериопланктонное сообщество. В середине лета добавление лизина и глицина в микроэкосистемы приводило к изменению структуры бактериопланктона, а именно в бактериальном сообществе резко увеличивалась численность видов, потребляющих данные аминокислоты, по сравнению с исходной пробой и контрольной микроэкосистемой. Весенние и позднелетние планктонные сообщества бактерий практически не реагировали на добавки лизина, глицина и аргинина. Реакция бактериопланктонного сообщества на добавление лизина зависела от его концентрации. Полученные данные дают основание предполагать, что способность экосистемы водоёма к самоочищению от тех или иных загрязняющих органических веществ может существенно зависеть от сезонной сукцессии бактериального сообщества.

Введение Важнейшей задачей экологии является описание структуры и функции природных экосистем, то есть определение видового состава и экологической роли каждого вида. Одним из самых малоизученных компонентов водных экосистем является бактериопланктон. В настоящее время состав бактериопланктонного сообщества может быть легко определён благодаря анализу генов 16S рибосомальной РНК. В то же время одной из самых актуальных задач остаётся исследование биогеохимической функции, выполняемой отдельными видами бактриопланктона.

Перспективным методом для изучения потребления различных веществ отдельными видами бактериопланктона является метод экспериментальных микроэкосистем (МЭС), содержащих пробы природного сообщества бактериопланктона, в которые добавляются тестируемые питательные вещества. Ранее было установлено, что в МЭС в течение недели сохраняется и функционирует естественное планктонное сообщество (Гладышев, 1992). Для мониторинга изменений состава доминирующих видов внутри бактериальных сообществ в МЭС часто используется метод разделения амплифицированных фрагментов гена 16S рибосомальной РНК с помощью денатурирующего градиентного гель-электрофореза (ДГГЭ) (Martin et al., 2012).

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

В качестве тестовых добавок для гетеротрофного бактериопланктона были выбраны аминокислоты, поскольку эти вещества в больших количествах выделяются из растущего и отмирающего фито- и зоопланктона и являются одним из наиболее предпочитаемых бактериями органических компонентов. Целью настоящей работы было исследование потребления аминокислот некультивируемым бактериопланктоном эвтрофного водохранилища Бугач. Были поставлены следующие задачи: 1) молекулярно-генетическая идентификация бактериопланктона водохранилища Бугач, потребляющего определённые аминокислоты; 2) изучить влияние добавок различных аминокислот на динамику видов бактериоплактона в разные периоды вегетационного сезона (весна, лето, осень); 3) выяснить, устойчиво ли влияние добавок аминокислот на бактериопланктонное сообщество водохранилища в разные годы; 4) изучить влияние добавок одной аминокислоты в разных концентрациях на бактериопланктонное сообщество.

Материал и методика Всего в разное время было проведено 4 эксперимента: 1) Эксперимент I – с 30 июня по 6 июля 2004 г.; 2) Эксперимент II – с 17 по 23 августа 2005 г.; 3) Эксперимент III – с 17 по 23 мая 2006 г.; 4) Эксперимент IV – с 30 июля по 5 августа 2009 г.

Выбранные для экспериментов аминокислоты глицин, лизин и аргинин являлись характерными кислотами в общем пуле аминокислот водохранилища; их концентрация составляла десятые доли миллиграмма на литр, при этом сезонная динамика концентраций этих кислот в водохранилище была различной (Kalachova et al., 2004). Источниками этих аминокислот служили различные организмы экосистемы водохранилища.

Эксперименты проводили в лабораторных микроэкосистемах объемом 10 л. Пробы воды из водохранилища, содержащие естественный планктон, инокулировали в МЭС. В эксперименте I в одну МЭС была добавлена аминокислота лизин (100 мг/л), в другую – глицин (100 мг/л). Ещё одна МЭС служила контролем. Режим освещения и температура воды имитировали естественные значения. При заполнении МЭС бралась исходная проба воды, далее после внесения добавки ежедневно в течение 5 суток отбиралось по 100 мл воды для анализа состава бактериопланктона.

Бактериопланктон из каждой пробы концентрировали фильтрованием и выделяли геномную ДНК как описано ранее (Колмакова и др., 2011). Далее амплифицировали фрагменты гена 16S рРНК с помощью полимеразной цепной реакции. ПЦР-продукты использовали для анализа методом ДГГЭ с последующей денситометрической обработкой цифровых изображений полученных гелей. Также выполняли кластерный анализ матриц гелей по методу одного звена с использованием евклидовых расстояний. Представляющие интерес полосы ДНК выделяли из полиакриламидного геля, реамплифицировали и далее клонировали и определяли их нуклеотидные последовательности. Полученные нуклеотидные последовательности генов 16S рибосомальной РНК сравнивали с последовательностями из баз данных генов. Подробное описание методики молекулярно-генетического анализа представлено в (Колмакова и др., 2011) Эксперименты II, III и IV проводили и обрабатывали аналогично, но без идентификации бактериопланктона. В отличие от экспериментов I и III, в эксперименте II вместо глицина во вторую МЭС был добавлен аргинин в концентрации 100 мг/л. В эксперименте IV во все три МЭС был добавлен лизин в концентрациях 1, 10, 100 мг/л.

Результаты Результаты I эксперимента подробно приведены в (Колмакова и др., 2011). Были идентифицированы бактерии, потреблявшие глицин и лизин. Отдельные таксоны некультивируемого свободноживущего бактериопланктона оказались узкоспециализированными по способности к потреблению отдельных аминокислот.

Фотография ДГГЭ-геля с образцами сообщества бактериопланктона из эксперимента II представлена на рисунке 1. В контрольной МЭС в течение всего эксперимента не происходило существенных качественных и количественных изменений состава бактериопланктона по сравнению с исходной пробой. Данный результат означает, что в контрольной МЭС в течение всего эксперимента функционировало естественное сообщество бактериопланктона водохранилища. Однако в экспериментальных МЭС с добавками лизина и аргинина также не произошло значительных изменений состава сообщества бактериопланктона по сравнению с исходной точкой.

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

Фотография ДГГЭ-геля с образцами сообщества бактериопланктона из эксперимента III представлена на рисунке 2. Как и в эксперименте II, ни в одной из МЭС эксперимента III не произошло значительных изменений качественного и количественного состава бактериопланктона.

Фотография ДГГЭ-геля с образцами сообщества бактериопланктона из эксперимента IV представлена на рисунке 3. В исходной пробе отмечено 3 доминантных вида бактерий, условно обозначенных IVa, IVb и IVc.

Во всех МЭС этого эксперимента после добавки лизина произошли значительные изменения качественного и количественного состава бактериопланктона. Вид IVc продержался в доминантах первые три дня только в МЭС с добавкой 1 мг/л лизина (МЭС1). Также в МЭС1 на протяжении всего эксперимента виды IVa и IVb оставались доминантными. В МЭС с добавкой 10 мг/л лизина (МЭС10) они доминировали лишь в первые дни, а в МЭС с добавкой 100 мг/л лизина (МЭС100) они сразу исчезли из состава доминантов. Зато уже во вторые сутки в МЭС100 в доминанты вышли виды Lys1, Lys2 (те же виды, что потребляли лизин в эксперименте I, как было установлено благодаря повторной постановке ДГГЭ с нанесением на тот же гель образца из МЭС с добавлением 100 мг/л лизина эксперимента I, см. (Трусова и др., 2012)), IVd и IVe. Виды Lys1 и IVd доминировали в течение первых дней во всех МЭС эксперимента IV, а Lys2 оставался доминантным видом на всём протяжении эксперимента во всех МЭС. На третий день эксперимента в МЭС с добавками 1 и 10 мг/л лизина в доминанты вышел и оставался им до конца вид IVf. Вид IVg значительно увеличил свою долю к четвёртому дню эксперимента в МЭС100, и к шестому – в МЭС1 и МЭС10. Вид IVh появился также на четвёртый-пятый день только в МЭС100. Вид IVi стал доминантом к концу эксперимента во всех МЭС. Вид IVj вышел в доминанты к концу эксперимента в МЭС1.

–  –  –

Рис. 1. ПЦР-ДГГЭ образцов бактериопланктона из МЭС с добавкой 100мг/л лизина, МЭС с добавкой 100 мг/л аргинина, контрольной МЭС и исходной пробы (1 Исх) эксперимента II. Номер дорожки соответствует суткам эксперимента. Для сравнения на дорожке I–3 представлен образец из МЭС с добавлением 100 мг/л лизина эксперимента I (сутки 3).

–  –  –

Рис. 2. ПЦР-ДГГЭ образцов бактериопланктона из МЭС с добавкой 100мг/л лизина, МЭС с добавкой 100 мг/л глицина, контрольной МЭС и исходной пробы (1 Исх) эксперимента III. Номер дорожки соответствует суткам эксперимента.

–  –  –

Обсуждение В эксперименте IV после добавления лизина во всех МЭС в доминанты выходят те же виды Lys1 и Lys2, что и в I эксперименте (Колмакова и др., 2011). Вероятно, отклик летнего сообщества бактериопланктона на добавку лизина устойчив и повторяется в разные годы.

В динамике бактериопланктонного сообщества в эксперименте IV можно заметить некоторые закономерности (Рис. 3). Виды Lys1, Lys2 и IVd доминировали во всех МЭС вне зависимости от концентрации лизина. В ходе эксперимента доли видов, доминировавших в исходной пробе (IVa, IVb и

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

IVc) уменьшились, и тем скорее, чем больше была концентрация аминокислоты в МЭС. Доли других видов (IVg, IVi) увеличились в ходе эксперимента, и тем быстрее, чем больше была концентрация лизина. Отдельные виды доминировали только в МЭС с наибольшей (IVe, IVh) или наименьшей (IVf, IVj) концентрацией лизина. Таким образом, виды бактериопланктона реагируют по-разному на добавление различных концентраций одной и той же аминокислоты.

Примечательно, что в экспериментах I (проводился в июле) и IV (в начале августа) после добавления аминокислот произошли значительные изменения в сообществах бактериопланктона экспериментальных МЭС, в то время как в экспериментах II (в конце августа) и III (в мае) таких изменений не было. Таким образом, в июле и начале августа сообщества бактериопланктона отреагировали на добавку лизина сильным и устойчивым изменением видового состава, а в мае и конце августа такого отклика не наблюдалось. Одной из возможных причин этого явления может быть отличие видового состава весеннего и позднелетнего бактериопланктона водохранилища от летнего сообщества бактерий. Вероятно, весной и поздним летом бактерии, специализирующиеся на потреблении лизина, в сообществе отсутствовали или были функционально неактивны. Так, низкие температуры воды или иные физические и биотические факторы весной и поздним летом могли препятствовать размножению бактериопланктона, потребляющего данную аминокислоту.

Выводы

1) С использованием нестерильного культивирования в экспериментальных микроэкосистемах выявлены виды летнего бактериопланктона водохранилища, питающиеся лизином и глицином.

2) Установлено, что исследованные виды свободноживущего бактериопланктона являются узкоспециализированными по потреблению отдельных аминокислот.

3) Отклик летнего сообщества бактериопланктона на добавку лизина устойчив и повторяется в разные годы.

4) В отличие от летних экспериментов, добавление лизина в весеннее и позднелетнее пелагическое сообщество водохранилища не вызвало значительных изменений количественного и качественного состава бактериопланктона.

5) Виды бактериопланктона реагируют по-разному на добавление различных концентраций одной и той же аминокислоты.

Список литературы Гладышев М.И. Экспериментальные экосистемы и их применение для изучения биодеградации легкоокисляемых токсикантов в пелагиали (обзор) // Гидробиологический журнал. 1992. Т. 28. № 5. С. 68–77.

Колмакова О.В., Трусова М.Ю. Потребление аминокислот некультивируемым бактериопланктоном эвтрофного водохранилища // Сибирский экологический журнал. 2011. № 1. С. 13–21.

Трусова М.Ю., Колмакова О.В., Гладышев М.И. Сезонные особенности потребления лизина некультивируемым бактериопланктоном эвтрофного водохранилища // Сибирский экологический журнал. 2012. № 4. С. 529–539.

Kalachova G.S., Kolmakova A.A., Gladyshev M.I., Kravchuk E.S., Ivanova E.A. Seasonal dynamics of amino acids in two small Siberian reservoirs dominated by prokaryotic and eukaryotic phytoplankton // Aquat. Ecol. 2004. Т. 38. № 1. С. 3–15.

Martin A., McMinn A., Davy S.K., Anderson M.J., Miller H.C., Hall J.A., Ryan K.G. Preliminary evidence for the microbial loop in Antarctic sea ice using microcosm simulations // Antarctic Science. 2012. Т. 24. № 06. С. 547–553.

Consumption of amino acids by uncultured bacterioplankton of an eutrophic reservoir O.V. Kolmakova, M.Yu. Trusova Freshwater bactrioplankton community profiles were studied in laboratory microecosystems with differing amino acid amendments. Overall four experiments (2004, 2005, 2006 and 2009) were conducted in various periods of vegetative seasons. Also the effect of lysine in different concentrations on bacterioplankton community was studied. In midsummer lysine and glycine amendments have led to changes in bacteroplankton community structure in the experimental microecosystems. The abundance of operational taxonomic units (OTU) consuming the relevant amino acids increased compared to the initial sample and the control microecosystem. Spring and late summer bacterioplankton communities did not respond to lysine, glycine and arginine amendments. Bactrioplankton OTU response to different concentrations of lysine varied. The obtained results suggest that water ecosystem ability for self-purification might depend on the seasonal succession of bacterial community.

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

Методы отбора проб при изучении удельных поверхностей и структуры зарослей нитчатых водорослей и цианобактериальных матов К.А. Корляков ООО «Корфиш», 454048, г. Челябинск, ул. Омская 67, E-mail: Korfish@mail.ru В статье рассмотрены методы, использующиеся при взятии проб нитчатых водорослей и трихомных цианобактерий. Обсуждается актуальность исследования структуры и распределения их зарослей. Предложен набор инструментов, в том числе из других научно-прикладных направлений для изучения удельных поверхностей данных водорослей. Обсуждаются преимущества и недостатки тех или иных приборов.

Нитчатые эукариотические водоросли и трихомные цианобактерии очень обильны во внутренних водоемах, особенно в фазах наибольшей продуктивности водных экосистем и зачастую определяют многие характеристики биотического баланса.

Эти группы водорослей представлены биопленками, цианобактериальными матами, отдельными зарослями высотой иногда более 1 м, а также входят в состав ценозов зарослей макрофитов. Заросли нитчатых водорослей и цианобактериальных матов различны по структуре, представлены набором различных конфигураций, форм, плотностей, размеров. Структура этих зарослей очень различна и меняется от конкретных условий в водоеме. Эти заросли представляют обширные биотопы для гетеротрофных организмов различных трофических уровней вплоть до самых верхних звеньев – рыб. Помимо различных животных заросли водорослей и цианобактерий заполнены внеклеточными биополимерами (слизистый матрикс) выделяемыми самими водорослями, минеральными загрязнителями и газовыми пузырьками. Доля вышеперечисленных компонент входящих в структуру зарослей водорослей также очень динамична во времени. Таким образом, нитчатые водоросли и трихомные цианобактерии являются центрами образования сложных биоценозов и обеспечивают гетеротрофных организмов не только пищей, но и биотопами. В связи с чем большой интерес представляет изучение удельных поверхностей данных экоморф первичных продуцентов, которые изучены достаточно слабо как во внутренних водах, так и морских (Нестеренко, 1987; Хайлов, Юрченко, Шошина, 2001; Миничева, Зотов, Косенко, 2003). В свою очередь удельные поверхности наземных растений изучены более подробно (Площадь поверхности…, 2008).

Удельные поверхности похожих экоморфологических форм таких например как гифы грибов и актиномицетов изучены также более подробно (Звягинцев, 1987; Звягинцев, Зенова, 2001).

Основная проблема при изучении нитчатых водорослей заключается в том, что они достаточно жесткие и при взятии проб площадными приборами разрушается структура зарослей. Здесь не подходят трубчатые и цилиндрические дночерпатели, так как они приспособлены для работы с плотными, но высоко дискретными средами (Методика изучения…, 1975). Не подходят и классические биоценометры, так как они используются для взятия больших проб достаточно рыхлых и разреженных зарослей макрофитов (Катанская, 1981). Высокая твердость талломов нитчатых водорослей обусловлена их способностью связывать достаточно крупные фракции грунта и расселятся в лотических экосистемах путем образования структур похожих на «канаты». При изучении удельных поверхностей зарослей нитчатых водорослей и цианобактериальных матов в первую очередь может прийти на помощь инструментарий медицины в виде различных по конфигурации зажимов (Рис.). Эти инструменты позволяют брать достаточно маленькие пробы из различных по плотности зарослей, соблюдая площадные нормативы. Однако высокая точность в количестве попавших в пробу нитей водорослей осложняется привлечением дополнительных инструментов в идее ножниц, обработка которыми создает дополнительную работу, которая и может дать погрешность. Вторым негативным фактором использования медицинских зажимов является, то что в пробу не попадают беспозвоночные животные и микроорганизмы, которые в случаях попаданию в пробу сильно разрушаются делая невозможным их идентификацию. Группой приборов для изучения более крупных проб нитчатых водорослей можно считать сконструированные нами различные по форме и конфигурации грабельки. Эти грабли помимо удельных поверхностей позволяют изучать вертикальную структуру зарослей и состав альгоценозов, характер распределения нитей по ярусам. Работа с этими грабельками также требует дополнительных режущих инструментов. Эти инструменты способствуют попаданию в пробы гетеротрофных животных, но не обеспечивают стопроцентного присутствия пелагических не прикрепленных форм ввиду стока воды. Наиболее оптимальным прибором для вырезания проб нитчатых водорослей и

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

цианобактерий со всем комплексом гетеротрофных организмов являются трубки с заточенными краями и грушей на другом конце. Эти приборы путем вставления их в заросли водорослей и проворачивания под небольшим давлением на 1800 с последующим разжатием груши позволяют получать пробы водорослей со всеми гетеротрофными организмами. Однако по сравнению с предыдущими инструментами в этом случае нельзя получить данные о вертикальном распределении водорослей.

Рис. 1 – медицинские зажимы различных конфигураций; 2 – грабельки различные по конфигурации;

3 – трубка с заточенными краями и грушей на конце.

Данные методы позволили получить характеристики о полной поверхности нитчатых харовых и зеленых водорослей родов Spirogyra, Ulothrix, и цианобактерий рода Phormidium, вертикальном распределении различных видов нитчатых водорослей. А также количественные характеристики связи численности гетеротрофных животных с поверхностями этих водорослей (Корляков, Корлякова, 2010). Установлено, что индекс полной поверхности зарослей нитчатых водорослей колеблется в пределах 10–60 м2/м2. То есть поверхность водорослей может превышать площадь поверхности донных отложений, на которых эти водоросли расположены в 60 раз. Также установлена статистически значимая связь между индексом полной поверхности водорослей и различными животными, населяющими эти заросли: простейшими, нематодами, олигохетами, личинками насекомых, ракообразными, моллюсками и даже рыбами.

Список литературы Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М.: МГУ, 1987. 256 с.

Звягинцев Д.Г., Зенова Г.М. Экология актиномицетов. М.: ГЕОС, 2001. – 256 с.

Катанская В.М. Высшая водная растительность континентальных водоемов СССР: методы изучения / В.М.

Катанская. Л.: Наука, 1981. 187 с.

Корляков К.А., Корлякова Е.М. Индекс листовой и полной поверхностей декоративных водных растений // Материалы III международной научно-практической конференции «Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды», 22-23 ноября 2010. Челябинск: изд-во Челябинского государственного педагогического ун-та, 2010. С. 76–77.

Методика изучения биогеоценозов внутренних водоемов. М.: Наука, 1975. 240 с.

Миничева Г.Г., Зотов А.Б., Косенко М.Н. Методические рекомендации по определению комплекса морфофункциональных показателей одноклеточных и многоклеточных форм водной растительности // ГЭФ ПРООН Проект по восстановлению экосистем Черного моря. Одесса. 2003. 32 с.

Нестеренко Г.В. Сравнительная характеристика цилиоценозов на искусственных и естественных субстратах // Жизнь континентальных вод. Борок. Б.и. 1989. ч. 4. С. 58–59.

Площадь поверхности лесных растений: сущность, параметры, использование. М.: Наука, 2008. 292 с.

–  –  –

Хайлов К.М., Юрченко Ю.Ю., Шошина Е.Е. О геометрических, биологических и трофодинамических водных биокосных фитосистем // Океанология, 2001, Т. 41, №3, с.400–407.

Sampling methods in the study of the specific surface and the structure of the thickets of filamentous algae and cyanobacterial mats K.A. Korlyakov In article the methods which are using at sampling of nitchaty algas and trikhomny tsianobakteriya are considered. Relevance of research of structure and distribution of their thickets is discussed. The tool kit, including from other scientific and applied directions for studying of specific surfaces of these algas is offered.

Advantages and shortcomings of these or those devices are discussed.

–  –  –

Данное исследование посвящено разработке нового метода очистки воды от условно-патогенных микроорганизмов с использованием комплексного фотодинамического воздействия и нанокрасителя на основе наночастиц диоксида титана и бриллиантового зеленого. Было показано, что данный метод эффективно сокращает численность таких бактерий как Staphylococcus aureus 209 P и Esherichia coli 113-13.

Введение Вода природных источников всегда содержит разные виды микроорганизмов.

В зависимости от происхождения водоисточника, а также от наличия органических загрязнений, количество микроорганизмов может значительно варьировать. В воде могут обитать бактерии, вирусы, простейшие, а также микроскопические водоросли и грибки. Условно-патогенные микроорганизмы в небольших количествах не приносят организму человека существенного вреда, но при определенных условиях становятся болезнетворными. Заболевания, пути передачи которых связанны с водой, остаются одной из важнейших проблем здравоохранения во всем мире (Руководство…, 2011).

Микроорганизмы, находящиеся в воде, постоянно подвергаются воздействию различных естественных физических, химических, биологических факторов, что способствует самоочищению водоемов. Современные методы очистки воды, такие как метод обратного осмоса, дистилляция, хлорирование, озонирование, фторирование и другие имеют свои преимущества и недостатки (Кузубова, Кобрина, 1996).

Мы предлагаем использовать для очистки воды от условно-патогенных микроорганизмов метод фотодинамического воздействия, который сочетает в себе применение лазерных или светодиодных источников излучения и красителя-фотосенсибилизатора для локализованного деструктивного воздействия на клетки микроорганизмов.

Целью работы являлось изучение действия комбинированного синего (405 нм) и красного (625 нм) светодиодного излучения (СИ) в сочетании с нанокрасителем на основе диоксида титана и бриллиантового зеленого на условно-патогенные микроорганизмы.

Материалы и методы Объектами исследования являлись микроорганизмы: Staphylococcus aureus 209 P и Esherichia coli 113-13 (ГИСК им. Л.А. Трасевича, г. Москва). Микроорганизмы выращивали при температуре 37 °С на ГРМ-агаре.

Использовали источник излучения: светодиоды с максимумами спектров испускания =405±20 нм и =625±15 нм и плотностью мощности 31.5 и 33 мВт/см2 соответственно. Во всех экспериментах режим излучения был непрерывный. Время облучения варьировали от 5 до 30 мин.

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

В качестве фотоактивного компонента использовали смесь наночастиц диоксида титана (TiO2;

концентрация 0,02 %) и красителя бриллиантовго зеленого (концентрация 0,0001%).

Для проведения экспериментов использовали схему, разработанную ранее (Тучина и др., 2008).

Источник света располагали над ячейками полистирольного планшета. Бактериальную взвесь в концентрации 104 мк/мл объемом 0,1 мл вносили в 0,9 мл раствора нанокрасителя, инкубировали в течение 10 мин без доступа света. Из разведения 103 мк/мл, а также из раствора нанокрасителя бактериальную взвесь в объеме 0,2 мл вносили в ячейки планшета. Воздействие проводили последовательно увеличивая дозу излучения. После 5, 10, 15 и 30 мин облучения взвеси бактерий переносили на чашки Петри с плотной питательной средой. Учет результатов проводили путем подсчета числа колониеобразующих единиц (КОЕ) через 24 – 72 часа после инкубации при 37С.

Контролем служили взвеси бактерий не обработанные нанокрасителем и не подвергнутые облучению. Каждый эксперимент проводили в десятикратной повторности.

Результаты Установлено, что микроорганизмы S. aureus чувствительны к действию СИ. Последовательное увеличение времени облучения от 5 до 30 минут приводило к сокращению числа колоний на 30 – 77%. Показано, что при использовании нанокрасителя чувствительность данных микроорганизмов к действию СИ существенно возрастает. Отмечено уменьшение числа колоний на 60 – 80% после воздействия в течение 5 – 30 минут (Рис. 1).

Рис 1. Действие светодиодного (405; 625 нм) излучения на микроорганизмы сверху – S. aureus; снизу

– E. coli.

Для дальнейших исследований в качестве модельного объекта использовали санитарнозначимые микроорганизмы E. coli. Облучение клеток данного вида обеспечивало незначительный угнетающий эффект. Сокращение числа КОЕ отмечено на 10–20 % при варьировании времени облу

<

Материалы XV Школы-конференции молодых ученых «Биология внутренних вод»

чения от 5 до 30 минут. После обработки клеток E. coli нанокрасителем уменьшение числа колоний происходило на 30–60% (Рис. 1).

Таким образом, используя метод фотодинамического воздействия в сочетании с нанокрасителем на основе наночастиц диоксида титана и красителя бриллиантового зеленого, удается достичь выраженного сокращения численности таких условно-патогенных микроорганизмов как золотистый стафилококк и кишечная палочка. Разумеется, предоженная методика нуждается в дальнейшем усовершенствовании и проведении экспериментов с большим числом санитарно-значимых микроорганизмов, что и является перспективой наших дальнейших исследований.

Список литературы Всемирная организация Здравоохранения. Руководство по организации и проведению эпидемиологического надзора за болезнями, связанными с водой. // 23с.

Кузубова Л. И., Кобрина В. Н. Химические методы подготовки волы (хлорирование, озонирование, фторирование) // Аналит. Обзор / СО РАН, ГННТБ, НИОХ. – Новосибирск, 1996. Сер. «Экология». Вып. 42. 132с.

Тучина Е.С., Тучин В.В., Альтшулер Г.Б., Ярославский И.В. Фотодинамическое воздействие красного (625 нм) излучения на бактерии вида Propionibacterium acnes, обработанные фотосенсибилизатором // Естественные и технические науки. 2008. № 2 (34). С. 90 – 93.



Pages:     | 1 |   ...   | 11 | 12 || 14 | 15 |   ...   | 25 |

Похожие работы:

«В.И. Лапшина, Д.И. Рокотова, В.А. Самкова, А.М. Шереметьева Биология ПримернАя рАБочАя ПрогрАммА По учеБному Предмету 5-9 КЛАССЫ Учебно-методическое пособие Москва АКАДЕМКНИГА/УЧЕБНИК УДК 372.857 ББК 74.26:28я721 Л Лапшина, В.И. Биология. Примерная рабочая программа по учебноЛ24 му предмету. 5–9 кл. : учебно-методическое пособие/ В.И. Лапшина, Д.И. Рокотова, В.А. Самкова, А.М. Шереметьева. М. : Академкнига/Учебник, 2015. — 128 с. ISBN 978-5-494-00846Пособие содержит примерную рабочую программу...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт Биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Алексеева Н.А. ГЕОГРАФИЯ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 35.03.10 Ландшафтная архитектура профиль подготовки «Садово-парковое и ландшафтное строительство» очная форма обучения...»

«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра анатомии и физиологии человека и животных Соловьев В.С. НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ ПРАКТИКА Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 020400.68 Биология; магистерская программа: «Физиология человека и животных». Форма обучения – очная Тюменский...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики С. И. Шаповалов Основы экологии Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 080200.62. Менеджмент (уровень бакалавриата) форма обучения очная и заочная Тюменский государственный университет Шаповалов С. И. Основы...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт Биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Мелентьева Алла Анатольевна БИОЛОГИЯ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов 28.03.01. направления «Нанотехнологии и микросистемная техника»; форма обучения – очная Тюменский государственный университет...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики О.Н. Жигилева ОСНОВЫ ЭКОЛОГИИ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 42.03.02 Журналистика (уровень бакалавриата), профили подготовки «Печать», «Телевизионная журналистика», «Конвергентная журналистика»,...»

«ЛИСТ СОГЛАСОВАНИЯ от 26.05.2015 Рег. номер: 590-1 (21.04.2015) Дисциплина: Структура и функции ферментов Учебный план: 06.03.01 Биология/4 года ОДО Вид УМК: Электронное издание Инициатор: Кыров Дмитрий Николаевич Автор: Кыров Дмитрий Николаевич; Шалабодов Александр Дмитриевич Кафедра: Кафедра анатомии и физиологии человека и животных УМК: Институт биологии Дата заседания 24.02.2015 УМК: Протокол заседания УМК: Дата Дата Результат Согласующие ФИО Комментарии получения согласования согласования...»

«КАЗАНСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Общеуниверситетская кафедра физического воспитания и спорта Т.А.АРСЛАНОВА, Л.В.БУХТОЯРОВА, А.П.ГРИГОРЬЕВ, Е.М. КОЩЕЕВ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КРУГОВОЙ ТРЕНИРОВКИ В ПОДГОТОВКЕ К СДАЧЕ НОРМ ГТО У БАСКЕТБОЛИСТОВ Методическое пособие Казань-2015 УДК: 612.63/66 (075.83) Печатается по решению общеуниверситетской кафедры физической культуры и спорта Казанского (Приволжского) федерального университета, протокол № 7 от 15.05.2015г Рецензенты: доктор биологических наук, доцент...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра зоологии и эволюционной экологии животных Н.Я. Попов НАУКИ О ЗЕМЛЕ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 – Биология (уровень бакалавриата), профили подготовки «Зоология», форма обучения очная Тюменский государственный...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Ярославский государственный университет им. П. Г. Демидова Кафедра ботаники и микробиологии Анатомия и морфология растений Учебно-методическое пособие Рекомендовано Научно-методическим советом университета для студентов, обучающихся по направлению Биология Ярославль ЯрГУ УДК 581.8(072) ББК Е56я73 А64 Рекомендовано Редакционно-издательским советом университета в качестве учебного издания. План 2015 года Рецензент кафедра ботаники и...»

«Сергей Викторович Пушкин Кадастр жесткокрылых насекомых (insecta: coleoptera) Предкавказья и сопредельных территорий http://www.litres.ru/pages/biblio_book/?art=11824002 Кадастр жесткокрылых насекомых (insecta: coleoptera) Предкавказья и сопредельных территорий. Учебное пособие : Директ-Медиа; М.-Берлин; 2015 ISBN 978-5-4475-3629-9 Аннотация Допущено учебно-методическим объединением по классическому университетскому образованию в качестве учебного пособия для студентов высших учебных заведений,...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Боме Н.А.БЕЗОПАСНОСТЬ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ РИСКИ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология, форма обучения очная Тюменский государственный...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Боме Н.А. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРИКЛАДНЫЕ АСПЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология (уровень магистратуры), магистерская программа...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Ярославский государственный университет им. П. Г. Демидова Т. А. Дружинина ОБЩАЯ ПАРАЗИТОЛОГИЯ И ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА Учебное пособие Рекомендовано Научно-методическим советом университета для студентов, обучающихся по направлениям Биология, Экология и природопользование Ярославль ЯрГУ УДК 576.8(075) ББК Е083я73 Д76 Рекомендовано Редакционно-издательским советом университета в качестве учебного издания. План 2014 года Рецензенты: В....»

«Казанский (Приволжский) федеральный университет Научная библиотека им. Н.И. Лобачевского Новые поступления книг в фонд НБ с 27 июня по 4 сентября 2015 года Казань Записи сделаны в формате RUSMARC с использованием АБИС «Руслан». Материал расположен в систематическом порядке по отраслям знания, внутри разделов – в алфавите авторов и заглавий. С обложкой, аннотацией и содержанием издания можно ознакомиться в электронном каталоге Неизвестный заголовок Материалы Всероссийской конференции с...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Рябикова В.Л. ОСНОВЫ ФЛОРИСТИКИ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 35.03.10 Ландшафтная архитектура (очная форма обучения) Тюменский государственный университет В.Л. Рябикова Основы флористики....»

«ЛИСТ СОГЛАСОВАНИЯ от 26.05.2015 Рег. номер: 597-1 (21.04.2015) Дисциплина: Экология человека Учебный план: 06.03.01 Биология/4 года ОДО Вид УМК: Электронное издание Инициатор: Кыров Дмитрий Николаевич Автор: Кыров Дмитрий Николаевич Кафедра: Кафедра экологии и генетики УМК: Институт биологии Дата заседания 24.02.2015 УМК: Протокол заседания УМК: Дата Дата Результат Согласующие ФИО Комментарии получения согласования согласования Зав. кафедрой Пак Ирина 24.03.2015 27.03.2015 Рекомендовано к (Зав....»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пермский государственный национальный исследовательский университет» Утверждено на заседании Ученого совета университета от 30.03.2011 №8 Основная образовательная программа высшего профессионального образования Направление подготовки 06.04.01 Биология Магистерская программа Гидробиология Квалификация (степень) магистр Учтены изменения 2013...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики И.В. Пак ГЕНЕТИКА РАЗВИТИЯ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология, магистерская программа «Экологическая генетика», форма обучения очная Тюменский государственный университет Пак И.В....»

«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра экологии и генетики Шаповалов С.И. ЭКОЛОГИЯ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов специальности 020501 – биоинженерия и биоинформатика очной формы обучения. Тюменский государственный университет Шаповалов С.И. «Экология». Учебно-методический комплекс....»







 
2016 www.metodichka.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Методички, методические указания, пособия»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.